Mașina complet automată de extracție și detecție a acidului nucleic New Tech

Cinci puteri:
● Instrument configurat cu etapa de extracție și purificare a acidului nucleic
● Instrument configurat cu modul de extracție cu ultrasunete
● Instrument configurat cu complet automat
● Instrument configurat cu amplificare cu temperatură variabilă
● Instrument configurat cu kit de reactivi complet inclus

1.Reactivii de detectare a acidului nucleic trebuie extrași și purificați?
Principiul detectării acidului nucleic este următorul: sub acțiunea primerului, ADN polimeraza este utilizată pentru a efectua amplificarea reacției în lanț pe ADN/ARN șablon (care necesită transcrierea inversă a NA), iar apoi este detectată cantitatea de semnal fluorescent eliberat pentru a determina dacă proba conține acidul nucleic (ADN/ARN) al agentului patogen care trebuie detectat.

1) Probele care nu au fost extrase sau purificate pot conține multe componente care afectează rezultatul final: nuclează (care poate dizolva acidul nucleic țintă și poate provoca fals negativ), protează (care poate reduce ADN polimeraza și poate provoca fals negativ), metale grele sare (care duce la inactivarea sintetazei și provoacă fals pozitiv), PH prea acid sau prea alcalin (care poate duce la eșecul reacției), ARN incomplet (care duce la eșecul fals negativ al transcripției inverse).

2) Unele probe sunt dificil de amplificat direct: Gram-pozitive și unii paraziți, din cauza pereților celulari groși și a altor structuri, dacă nu trec prin procesul de extracție și purificare a acidului nucleic, trusa fără extracție poate eșua pentru astfel de mostre.

Prin urmare, se recomandă să selectați trusa de testare sau instrumentul configurat cu etapa de extracție a acidului nucleic.

2. Extracție chimică sau extracție prin fragmentare ultrasonică fizică?
În general, extracția chimică poate fi aplicată la majoritatea pretratării și purificării.Cu toate acestea, în bacteriile Gram-pozitive cu pereți groși și unii paraziți, este, de asemenea, cazul că extracția chimică nu poate obține șabloane eficiente de acid nucleic, ceea ce duce la detectarea fals negativă.În plus, extracția chimică utilizează adesea agenți puternici, dacă eluția nu este minuțioasă, este ușor să se introducă alcalii puternice în sistemul de reacție, rezultând rezultate inexacte.

Fragmentarea cu ultrasunete folosește zdrobirea fizică, care a fost folosită cu succes de GeneXpert, o întreprindere lider în domeniul POCT pentru uz uman și are un avantaj absolut în extracția de acid nucleic a unor probe complexe (cum ar fi Mycobacterium tuberculosis).

Prin urmare, este recomandat să selectați un kit de testare sau un instrument configurat cu o etapă de extracție a acidului nucleic.și este optim dacă există un modul de extracție cu ultrasunete.

3. Manual, semi-automat și complet automat?
Aceasta este o problemă a costului forței de muncă și a eficienței muncii.În prezent, spitalele pentru animale de companie nu au suficient personal, iar extracția și detectarea acidului nucleic este o muncă care necesită anumite abilități și experiență.Nu există nicio îndoială că mașina complet automată de extracție și detecție a acidului nucleic este alegerea perfectă.

4. Amplificare la temperatură constantă sau amplificare la temperatură variabilă?
Reacția de amplificare este o legătură de detectare a acidului nucleic, iar tehnologia profesională implicată în această legătură este complexă.În linii mari, enzimele sunt folosite pentru a amplifica acidul nucleic.În procesul de amplificare, este detectat semnalul de fluorescență amplificat sau semnalul de fluorescență încorporat.În general, cu cât semnalul de fluorescență apare mai devreme, cu atât este mai mare conținutul de genă țintă al probei.

Amplificarea la temperatură constantă este o amplificare a acidului nucleic la o temperatură fixă, în timp ce amplificarea la temperatură variabilă este o amplificare ciclică strict conform denaturare-recoace-extensie.Timpul de amplificare cu temperatură constantă a fost efectuat, în timp ce timpul de amplificare cu temperatură variabilă este foarte afectat de rata de creștere și scădere a temperaturii instrumentului (în prezent, mulți producători au reușit să facă 40 de cicluri de amplificare în aproximativ 30 de minute).

Dacă condițiile de laborator sunt bune și zonarea este strictă, este rezonabil să spunem că diferența de precizie între cele două nu va fi mare.Cu toate acestea, amplificarea la temperatură variabilă va sintetiza mai mulți produși de acid nucleic într-un timp relativ mai scurt.Pentru laboratoarele fără zonare strictă și personal de pregătire profesională, riscul de scurgere de aerosoli de acid nucleic va fi mai mare, fals pozitiv apare odată ce se produce scurgerea și care este extrem de dificil de eliminat.

În plus, amplificarea la temperatură constantă este, de asemenea, mai predispusă la amplificarea nespecifică atunci când proba este complexă (temperatura relativă de reacție este mai mică și cu cât temperatura de extensie este mai mare, cu atât specificitatea de legare a primerului este mai bună).

În ceea ce privește tehnologia actuală, amplificarea cu temperatură variabilă este mai fiabilă.

5. Cum să evitați riscul de scurgere a produselor de amplificare a acidului nucleic?
În prezent, mulți producători aleg tubul PCR de tip gland ca tub de reacție cu acid nucleic, care este sigilat prin frecare, iar denaturarea temperaturii în denaturarea la temperatură variabilă în amplificarea PCR la temperatură variabilă ajunge la 90 de grade.
Centigrad .Procesul repetat de expansiune cu căldură și contracție cu frig este o mare provocare pentru etanșarea tubului PCR, iar tubul PCR de tip glandă este relativ ușor să provoace scurgeri.

Este de preferat să adoptați reacția cu un kit/tub complet etanș pentru a evita scurgerea produsului de reacție.Ar fi perfect dacă ar putea exista un kit complet sigilat pentru extracția și detectarea acidului nucleic.

Deci, noua mașină complet automată de extracție și detecție a acidului nucleic de la New Tech are cele cinci opțiuni optime de mai sus.